Monkeypox Virus Real Time PCR Kit

Kort beskrivning:

Katt.Nej	B001P-01	Storlek	48 Tester/Kit
Prov	Serum/ lesionsexsudat	Trans.& Sto.Temp.	-25～-15℃
Formatera	Premix lyofiliserades och alikvoterades i 8 remsor PCR-rör
Tillämpligt instrument	Realtids-PCR-instrument som ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio och BTK-8

Skicka e-post till oss

Produktdetalj

Produkttaggar

Produktinformation

Avsedd användning

Det används för att detektera Monkeypox Virus i humant serum eller lesionsexsudatprover genom att använda PCR-system i realtid.

Testprincip

Denna produkt är ett fluorescerande sondbaserat Taqman® realtids-PCR-analyssystem.Specifika primrar och prober är designade för detektion av F3L-genen från Monkeypox Virus.Intern kontroll riktad mot den mänskliga konserverade genen övervakar provtagningen, provhanteringen och PCR-processen i realtid för att undvika falsknegativa resultat.Satsen är ett fullständigt förblandat frystorkat system, som inkluderar material som behövs för detektion av Monkeypox Virus: nukleinsyraamplifieringsenzym, UDG-enzym, reaktionsbuffert, specifik primer och sond.

Huvudinnehåll

Komponenter som tillhandahålls är listade i tabellen.

Komponenter	Paket	Ingrediens
Monkeypox VirusLyofiliserad förblandning	8 remsor PCR-rör× 6 påsar	Primers, prober, dNTP/dUTP Mix, Mg2+, Taq DNA polymeras, UDG Enzyme
MPV positiv kontroll	400 μL×1 rör	DNA-sekvenser som innehåller målgenen
MPV negativ kontroll	400 μL×1 rör	DNA-sekvenser som innehåller humant gensegment
Lösande lösning	1 mL×1 rör	Stabilisator
Intyg om överensstämmelse	1 del	/

Operation Flow

1. ProvSamling:Provet ska samlas i sterila rör i enlighet med detta

med tekniska standardspecifikationer.

2. Reagensberedning (reagensberedningsområde)

Ta ut komponenterna i satsen, balansera dem vid rumstemperatur för standby-användning.

3. Provbearbetning (provbearbetningsområde)

3.1 Nukleinsyraextraktion

Det rekommenderas att ta 200 μL flytande prover, positiv kontroll och negativ kontroll för nukleinsyraextraktion, enligt motsvarande krav och procedurer för virala DNA-extraktionssatser.

3.2 Lösning av lyofiliserat pulver och tillsats av mall

Förbered Monkeypox Virus Lyofilized premix enligt antalet prover.Ett prov behöver ett PCR-rör som innehåller lyofiliserat premixpulver.Negativ kontroll och positiv kontroll bör behandlas som två prover.

(1) Tillsätt 15 μL upplösningslösning i varje PCR-rör som innehåller lyofiliserad förblandning, tillsätt sedan 5 μL extraherade prover/Negativ kontroll/Positiv kontroll i respektive PCR-rör.

(2) Täck PCR-rören ordentligt, snärta PCR-rören för hand tills det frystorkade pulvret är helt upplöst och blandat, samla upp vätskan till botten av PCR-rören genom omedelbar låghastighetscentrifugering.

(3) Om du använder ett vanligt realtids-PCR-instrument för detektion, överför sedan PCR-rör direkt till amplifieringsområdet;om du använder BTK-8 för detektion, måste du utföra följande operationer: överför 10 μL vätska från PCR-röret till reaktionschipbrunnen på BTK-8.Ett PCR-rör motsvarar en brunn på chipet.Se till att pipetten är 90 grader vertikal under pipettering.Aerosolbarriärpipettspetsarna ska placeras i mitten av brunnen med måttlig kraft och sluta trycka på pipetten när den når första växeln (för att undvika bubblor).Efter att brunnarna är fyllda, ta ut ett reaktionschipmembran för att täcka alla brunnar och chipet överförs sedan till amplifieringsdetektionsområdet.

4. PCR-förstärkning (detektionsområde)

4.1 Sätt PCR-rören/reaktionschipset i reaktionstanken och ställ in namnen på varje reaktionsbrunn i motsvarande ordning.

4.2 Inställningar för detektionsfluorescens: (1) Monkeypox-virus (FAM);(2) Intern kontroll (CY5).

4.3 Kör följande cykelprotokoll

Protokoll för ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio:

Steg		Temperatur	Tid	Cyklar
1	Fördenaturering	95 ℃	2 min	1
2	Denaturering	95 ℃	10 s	45
2	Glödgning, förlängning, fluorescensupptagning	60 ℃	30 s	45

Protokoll för BTK-8:

Steg		Temperatur	Tid	Cyklar
1	Fördenaturering	95 ℃	2 min	1
2	Denaturering	95 ℃	5 s	45
2	Glödgning, förlängning, fluorescensupptagning	60 ℃	14 s	45

5. Resultatanalys (se instrumentets användarmanual）

Efter reaktionen kommer resultaten att sparas automatiskt.Klicka på "Analysera" för att analysera, och instrumentet tolkar automatiskt Ct-värden för varje prov i resultatkolumnen.De negativa och positiva kontrollresultaten ska överensstämma med följande "6. Kvalitetskontroll".

6. Kvalitetskontroll

6.1 Negativ kontroll: Ingen Ct eller Ct>40 i FAM-kanal, Ct≤40 i CY5-kanal med normal förstärkningskurva.

6.2 Positiv kontroll: Ct≤35 i FAM-kanal med normal amplifieringskurva, Ct≤40 i CY5-kanal med normal amplifieringskurva.

6.3 Resultatet är giltigt om alla ovanstående kriterier är uppfyllda.Annars är resultatet ogiltigt.

Resultattolkning

Följande resultat är möjliga:

	Ct-värde för FAM-kanalen	Ct-värde för CY5-kanal	Tolkning
1#	Ingen Ct eller Ct>40	≤40	Monkeypox virus negativ
2#	≤40	Eventuella resultat	Monkeypox virus positiv
3#	40–45	≤40	Testa om;om det fortfarande är 40~45, rapportera som 1#
4#	Ingen Ct eller Ct>40	Ingen Ct eller Ct>40	Ogiltig

NOTERA: Om ogiltigt resultat inträffar måste provet samlas in och testas igen.

Beställningsinformation

produktnamn	Katt.Nej	Storlek	Prov	Hållbarhetstid	Trans.& Sto.Temp.
Monkeypox Virus Real Time PCR Kit	B001P-01	48 tester/kit	Serum/ lesionsexsudat	12 månader	-25～-15℃